可能原因 | 解決方法 |
洗板不充分 | 將洗滌緩沖液加入孔中洗滌,確保洗滌充分 |
確保在洗滌前棄掉了所有殘留抗體溶液 | |
樣品或標準品中含干擾物 | 設置空白對照 |
緩沖液受污染 | 重新配制緩沖液 |
可能原因 | 解決方法 |
試劑添加順序錯誤或試劑配制有誤 | 重復實驗 |
檢查試劑配制方法 | |
復核試驗試劑添加流程 | |
HRP被疊氮化合物污染 | 使用新鮮配制的試劑 |
抗體用量不足 | 使用推薦的抗體量 |
可能原因 | 解決方法 |
洗板不充分或跳過洗板步驟未去除殘留的非結合過氧化物酶 | 嚴格按照說明書洗滌流程操作 |
封板膠紙或試劑儲液槽重復使用導致HRP殘留污染 | 每步均需使用新的封板膜或試劑儲液槽 |
緩沖液有金屬或HRP污染 | 配制新鮮緩沖液 |
可能原因 | 解決方法 |
實驗操作流程有誤 | 嚴格按照說明書操作流程 |
標準曲線稀釋計算錯誤 | 重新計算制作新的標準曲線 |
可能原因 | 解決方法 |
洗板不充分 | 將洗滌緩沖液加入孔中洗滌,確保洗滌充分 |
重復使用封板膠紙 | 每步均需更換使用新的封板膠紙 |
未使用封板膠紙 | 需使用封板膠紙 |
可能原因 | 解決方法 |
洗板不充分 | 將洗滌緩沖液加入孔中洗滌,確保洗滌充分 |
確保已在洗滌前棄掉所有殘留溶液 | |
孵育溫度發生變化 | 嚴格按照推薦的溫度孵育 |
勿在環境溫度變化大的地方孵育 | |
操作流程改變 | 嚴格按照相同的操作流程 |
封板膠紙重復使用導致HRP殘留污染 | 每一步均使用新的封板膠紙 |
可能原因 | 解決方法 |
樣品中無檢測物或表達量極低 | 設置陽性對照 |
重復實驗 |
可能原因 | 解決方法 |
酶標儀波長設置不正確 | 檢查酶標儀參數設置 |
包被的酶標板超過使用效期 | 更換新批次試劑盒 |
可能原因 | 解決方法 |
孵育溫度不均衡 | 孵育時使用封板膠紙 |
勿在環境溫度變化大的地方孵育 |
可能原因 | 解決方法 |
酶標板未處于正確溫度下 | 確保使用前酶標板和試劑處于室溫下 |
溶液污染 | 避免使用含NaN3的試劑 |