ELISA實驗原理簡單,步驟少,流程短,試劑盒操作相對簡便,實驗小白也能輕松上手。然而,實驗上手雖快,想要得到可靠的實驗結果,卻并不那么容易。為了更好地助力實驗,這里將大家關心的ELISA試劑盒常見問題整理成文。
優化ELISA的重點之一在于洗滌。洗滌步驟可降低未結合抗體所引起的背景信號,從而增加分析的信噪比。每一步之間的洗滌確保只有特異的結合事件被保留,在最后一步產生信號。而不充分的洗滌會導致差異和高背景,從而帶來不理想的結果。
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加酶結合物后??乖贵w反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育。
那在ELISA實驗中,加樣 一定是繞不開的一環!ELISA測定操作非常簡單,一般涉及到樣本的收集保存、試劑準備、加樣、溫育、洗板、顯色、結果判斷和結果報告及解釋等方面,其中任一步驟的不當都會影響測定結果,且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。
可用于ELISA實驗的樣本一般有血清、血漿、尿液、細胞培養上清以及組織勻漿等。不同樣本類型的預處理方法也不同。適當的樣本預處理是確保ELISA實驗正確性和準確性的第一步。這里,我們將介紹幾種不同樣本類型的處理方法。